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如何正確使用qPCR封板膜?

更新時間:2025-10-27    點擊次數:561

  如何正確使用qPCR封板膜?

一、qPCR封板膜的正確使用方法

準備工作‌

從無酶自封袋中取出單張封板膜,避免手直接接觸粘合面‌。

若使用帶標簽的封板膜,需沿切線緩慢剝離襯紙,減少卷曲風險‌。

貼合步驟‌

將封板膜一端對齊孔板邊緣,逐步貼合并拉緊另一端,確保無褶皺‌。

使用壓膜板(或光滑卡片)以“十字交叉”方式刮壓:先水平方向兩次,再垂直方向兩次,確??组g和邊緣均密封‌。

密封檢查‌

確認封板膜與孔板緊密貼合,無液體殘留或氣泡,邊緣無翹起‌。

密封后靜置10分鐘,使粘合劑充分固化‌。

二、關鍵注意事項

避免漏液‌:96孔板可能存在公差變形,需多次刮壓確保密封性‌。

熒光兼容性‌:選擇高透光率(≥86%)的聚酯纖維或聚烯烴材質,減少信號干擾‌。

溫度耐受‌:確保封板膜耐熱性覆蓋qPCR循環溫度(如-20℃~120℃)‌。

三、常見問題解決

信號弱‌:檢查封板膜是否與qPCR儀光路匹配(如白色耗材增強反射)‌。

蒸發率高‌:優先選擇壓敏型封板膜,蒸發率需≤3%(尤其小體系樣本)‌。

通過規范操作和適配性選擇,可顯著提升qPCR結果的重復性和準確性‌。

注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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