Elisa實驗：競爭法測抗體的原理

　　以下是ELISA競爭法檢測抗體的原理詳解：

　　一、核心原理?

　　競爭法的核心在于?抗原-抗體的競爭性結合?，其反應機制為：

　　固相抗原?：預先包被在酶標板上的抗原作為固定結合位點?

　　競爭過程?：

　　樣本中的待測抗體(未標記)與酶標抗體(標記抗體)同時與固定抗原結合

　　待測抗體濃度越高，結合的酶標抗體越少，顯色越弱(顯色強度與待測抗體濃度成反比)?

　　二、關鍵步驟?

　　固相抗原包被?：將抗原固定于酶標板孔內?

　　競爭孵育?：加入樣本(含待測抗體)與酶標抗體混合液，孵育后形成競爭結合?

　　顯色檢測?：

　　結合的酶標抗體催化底物顯色

　　顏色越深，說明待測抗體越少;顏色越淺，待測抗體越多?

　　三、結果判讀要點?

　　現象? ?解釋? ?示例?

　　樣本孔顯色深 待測抗體少，酶標抗體結合多 陰性樣本

　　樣本孔顯色淺 待測抗體多，酶標抗體結合少 陽性樣本

　　四、與夾心法的區(qū)別?

　　競爭法?：顯色強度與待測物濃度?成反比?，適用于小分子抗原或抗體檢測?

　　夾心法?：顯色強度與待測物濃度?成正比?，適用于大分子抗原檢測?

　　以上原理綜合了抗原抗體競爭機制與顯色反比關系，適用于抗體定量檢測場景。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實驗依據，具體產品資料請咨詢技術老師或品牌供應商。

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